白血病NPM1基因突变检测方法的临床适用性比较
【出 处】:
【作 者】:
邹积艳
[1] ;
朱平
[1] ;
刘红星
[2] ;
张英
[1] ;
王赫
[2] ;
蔡鹏
[2] ;
卜定方
[1]
【摘 要】目的分析急性髓细胞白血病(AML)的NPM1(nucleophosmin)基因第12外显子突变,对比3种常用检测方法的临床适用性。方法随机选择54份AML患者的冻存骨髓细胞标本,提取DNA后PCR扩增NPM1基因第12外显子,分别进行PCR-毛细管电泳、变性高效液相色谱(DHPLC)和直接测序检测。FLT3内部串联重复(ITD)突变的检测采用FLT3PCR产物分别进行琼脂糖凝胶电泳和PCR-毛细管电泳检测。结果7例AML患者发现NPM1基因突变,其中5例为常见的A型突变,即960bp处插入TCTG4个碱基;1例为D型突变,即960bp处插入CCTG4个碱基;另1例为新发现的1种突变,在958bp处丢失TGGCAGTG8个碱基,插入GCCCGCGGTTTA 12个碱基。3种基因突变的检测方法检出率均为100%。毛细管电泳检测NPM1基因突变更快速可靠,且可同时检测FLT3-ITD突变。DHPLC的分辨率受实验因素的影响较多。直接测序步骤相对繁琐,而且有杂合子基因序列误读的可能性。结论AML存在一种NPM1基因的958bp位点12个碱基置换的基因突变;AML的NPM1基因突变临床检测采用PCR-毛细管电泳法更方便。
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